Что нужно знать о гриппе и ОРВИ в новом году: говорят специалисты

Двадцатого декабря 2022 года при поддержке портала PCR.NEWS прошел вебинар «Грипп и ОРВИ в сезоне 2022–2023 гг.: эпидемиология, особенности диагностики и терапии». Вебинар стал рекордным по количеству докладчиков и участников. Девять ведущих специалистов подробно разобрали вопросы мониторинга, диагностики и терапии респираторных инфекций, включая грипп и SARS-CoV-2. Отдельные доклады были посвящены респираторным заболеваниям детей и беременных женщин.


Источник изображения: 123rf.com

ВЫ МОЖЕТЕ ПОСМОТРЕТЬ ВИДЕОЗАПИСЬ ВЕБИНАРА ЗДЕСЬ

Доклад «Особенности эпидемиологического сезона 2022-2023 по гриппу и ОРВИ в мире и в России» представила ведущая вебинара, зам. директора по научной работе НИИ гриппа им. А.А. Смородинцева Дарья Даниленко. Во время пандемии COVID-19 снизилась заболеваемость гриппом, однако уже с начала 2022 года она снова начала расти, а в нынешнем сезоне грипп вернулся на лидирующие позиции среди респираторных инфекций. Сейчас в мире доминируют вирусы гриппа А, которые составляют 97,9% от всех случаев. В группе А преобладают штаммы субтипов H3N2 (85,6%) и H1N1 (14,4%). Вирусы гриппа B линии Виктория обнаруживаются в 2,1% случаев. По словам докладчицы, в странах северного полушария уровень заболеваемости стабильно высокий, однако различаются доминирующие штаммы: в Северной Америке, Европе и на востоке Азии преобладает A(H3N2); в Объединенных Арабских Эмиратах, Катаре и Саудовской Аравии — A(H1N1)pdm09 и вирусы группы B. В странах южного полушария сейчас затишье по гриппу, так как эпидемический сезон уже пройден.

Следующая часть доклада была посвящена так называемой тридемии — совокупности высокой заболеваемости гриппом, COVID-19 и респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ). В отличие от вирусов гриппа и SARS-CoV-2, для РСВ до сих пор отсутствует глобальный систематизированный мониторинг. По данным отдельных стран можно заключить, что в последние недели заболеваемость РСВ быстро растет, однако сейчас рост замедлился за счет возрастающего доминирования вируса гриппа.

Дарья Михайловна представила данные о заболеваемости гриппом по состоянию на 49-ю неделю 2022г. В России идет стабильный рост заболеваемости гриппом и ОРВИ — в среднем частота заболеваемости составила 143,6 случаев на 10 тысяч человек, что превышает эпидемический порог на 94,1%. Растет и частота госпитализаций. Эпидемия обусловлена в первую очередь штаммом A(H1N1)pdm09 — он выявляется в 18% образцов. Грипп ответственен за большинство тяжелых случаев ОРИ (34,3%). На 50-й неделе ожидается дальнейшее повышение всех показателей. (Актуальные данные по мониторингу гриппа.)
Пик заболеваемости РСВ в России уже прошел. В настоящее время этот вирус выявляется у 6,6% больных, преимущественно у детей младшей возрастной группы (0–2 года). Среди других негриппозных ОРВИ Даниленко обратила внимание на аденовирус, риновирус, вирусы парагриппа и метапневмовирус: последний по клинической картине очень схож с РСВ.

По сравнению с прошлым годом неизменными остались только вакцинные штаммы против H1N1pdm09; штаммы H3N2 и гриппа B, используемые в вакцинах были изменены в соответствии с выделенными антигенами. Это в очередной раз подчеркивает необходимость регулярной ревакцинации против гриппа.

Докладчица призвала не верить заявлениям медиа о возвращении «испанки»: «Практически любой вирус гриппа человека можно так или иначе по происхождению привязать к вирусу испанского гриппа. Но это не значит, что пришедший в 2009 году вирус — это “испанка”… Он давно стал вирусом сезонного гриппа».

Доклад «Грипп и беременность» представила заведующая лабораторией хронических вирусных инфекций института вирусологии им. Д.И. Ивановского Лидия Кистенева. По данным метаанализов установлено, что беременные женщины, заболевшие гриппом, попадают в больницу в четыре раза чаще, чем небеременные. Наиболее тяжело протекает заболевание на третьем триместре беременности — 8% пациенток требуется интенсивная терапия, а смертность достигает 16,9%. (Для сравнения, уровень смертности по всем госпитализированным взрослым — около 6%.) Преждевременные роды у пациенток с гриппом случаются втрое чаще, уровень перинатальной смертности выше в пять раз.

Лидия Борисовна рассказала, какие физиологические особенности лежат в основе такой повышенной восприимчивости. Физиологическая иммуносупрессия при беременности приводит к более частому возникновению вторичных инфекций. Повышенная чувствительности матери и плода к гипоксии обусловлена высокой потребностью в кислороде. Таким образом, беременность рассматривается как один из ведущих факторов риска при гриппе. Факторами риска тяжелого протекания инфекции у беременных также являются ЗППП, курение, частые случаи ОРВИ в анамнезе, патологии сердечно-сосудистой системы и ожирение. К наиболее частым осложнениям гриппа у беременных относятся тахикардия, респираторный дистресс-синдром, ДВС-синдром и инфекционно-токсический шок. Докладчица отметила, что высокая смертность обусловлена не только физиологическими факторами риска, но и отсутствием профилактики гриппа и поздним началом этиотропной терапии.

Среди особенностей протекания гриппа у беременных Лидия Борисовна выделила вовлечение в патологический процесс плаценты — интенсивные обменные процессы и активное деление клеток создают благоприятные условия для репликации вируса.

Следующая часть доклада была посвящена обширной статистике по ассоциированной с гриппом заболеваемости, госпитализации и осложнениям у беременных, а также методам лечения и профилактики. Важно, чтобы в лечении инфицированной беременной женщины участвовали врачи разных специальностей, подчеркнула докладчица. В качестве основных препаратов для лечения гриппа у беременных Лидия Борисовна назвала осельтамивир и занамивир. Необходимо учитывать, что более чем в половине случаев у беременных грипп протекает на фоне герпесвирусных инфекций.

Известно, что тяжелые формы гриппа повышают риск преждевременных родов и смерти плода. Для среднетяжелых и сезонных форм таких связей выявлено не было. Дети, рожденные от матерей, переболевших гриппом B при беременности, имели сниженный вес. Исследование, проведенное лабораторией Лидии Кистеневой, показало, что 22,5% женщин, перенесших грипп во время беременности, сообщили о нарушениях здоровья у ребенка.

Отвечая на вопросы, докладчица подчеркнула, что вакцинация от гриппа во время беременности не противопоказана, а, напротив, рекомендуется (за исключением первого триместра) и в настоящее время проводится не в достаточном объеме.

Анна Сафонова, директор по продуктовой политике лаборатории АО «ЛабКвест» рассказала о данных диагностики ОРВИ, полученных лабораторией в последние месяцы. АО «ЛабКвест» — многопрофильный автоматизированный комплекс мощностью более 3 млн пробирок в год, который обрабатывает образцы из 110 медицинских офисов в 32 регионах РФ и проводит более 2000 различных исследований. В частности, методом ПЦР определяется большинство распространенных ОРВИ, включая РСВ, вирус парагриппа, риновирус, вирусы гриппа A, B, H1N1-swine и коронавирус SARS-CoV-2. В лаборатории используются наборы производства «ДНК-Технология», ФБУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора и ФГБУ «ЦСП» ФМБА России.

По данным АО «ЛабКвест», пик выявления SARS-CoV-2 в 2022 году пришелся на август (12,3%), наименьший процент выявления наблюдался в июне (1,5%). По состоянию на декабрь частота выявления держится на уровне 6%. В ноябре 2022 года наибольший процент выявления SARS-CoV-2 наблюдался в Пермском крае (77,3%), на втором месте оказалась Ярославская область (37,9%), в Москве частота составила 4,5%. В декабре значительная доля ОРВИ пришлась на коронавирус в Пермском крае (69,4%), а также в Смоленской (29%) и Белгородской (25%) областях.

Суммарная частота выявления гриппа А и B с января по октябрь 2022 года составила 5%. В ноябре-декабре 2022 года грипп А обнаруживался в 38% образцов, грипп B в 4%. В декабре лаборатория начала тестирование на свиной грипп (A/H1N1), который в течение месяца выявлялся в 46% образцов. По встречаемости гриппа A/B лидируют Рязанская и Калужская области.

Среди других типов ОРВИ с августа по декабрь наиболее часто обнаруживались риновирус (32,6%), аденовирус (26,2%), метапневмовирус (16,3%) и РСВ (10,6%). Соотношение частоты различных инфекций менялось от месяца к месяцу. Так, в декабре и ноябре чаще всего встречались аденовирусные инфекции (5% и 12,3% соответственно). В девяти случаях были выявлены несколько вирусных инфекций в одном образце.

Руководитель проекта научно-исследовательского центра «ИМБИАН ЛАБ» Анастасия Черненко представила доклад «Стратегия сдерживания распространения гриппа на примере коронавирусной инфекции» (презентация в pdf). Анастасия Григорьевна напомнила, что ОРВИ — самый распространенный тип заболеваний человека; каждый год в мире выявляют более 500 млн случаев. Наиболее опасными являются вирусы гриппа А, B и коронавирус SARS-CoV-2. Для респираторных вирусов характерна сезонность и часто наблюдается доминирование одного вируса над другим.

К методам сдерживания респираторных вирусов относятся вакцинация и своевременная диагностика инфекционного агента. Анастасия Черненко привела данные о вакцинации в России на декабрь 2022 года — от гриппа привито около 52% населения, от COVID-19 около 70% — и подчеркнула, что эффективность вакцинации от гриппа зависит от соответствия вакцины циркулирующим в данный момент вирусам. ВОЗ осуществляет непрерывный мониторинг циркулирующих вирусов гриппа и два раза в год обновляет состав противогриппозных вакцин. Эффективность вакцины от COVID-19 в первую очередь обеспечивается регулярной вакцинацией (раз в полгода-год).

Основной метод диагностики ОРВИ — выявление вируса в мазках из носоглотки с помощью ПЦР. Метод крайне чувствителен и способен выявлять заболевание уже в первые дни инфицирования, однако требует дорогостоящего оборудования и квалифицированного персонала. Альтернативой служат иммунохроматографические экспресс-тесты. Они обладают меньшей чувствительностью, однако позволяют проводить тестирование непосредственно в пункте забора биологического материала и получать результат через 10–20 минут.

Анастасия Черненко проанализировала статистику заболеваемости COVID-19 в России с точки зрения эффективности диагностических методов. Вплоть до июня 2021 года основным методом диагностики COVID-19 в России был ПЦР-анализ. При этом считается, что ПЦР не оправдал себя как основной метод скрининга, так как лаборатории не справлялись с большим количеством пациентов, требующих диагностики. С лета 2021 года стали появляться первые экспресс тесты на антиген коронавируса, в результате число выявленных случаев заболевания выросло примерно вдвое. Осенью 2021 года правительство РФ разрешило использовать экспресс-тесты для диагностики и постановки диагноза. И уже в начале 2022 года наблюдается резкий скачок в выявлении случаев COVID-19, за которым последовал резкий спад, что, по словам докладчицы, говорит о своевременном принятии мер.

COVID-19 и грипп крайне сложно различить по симптоматической картине, в том числе из-за того, что оба заболевания могут проявляться широким спектром симптомов, от почти незаметного протекания до тяжелых осложнений. Разница в стратегиях лечения двух вирусов требует разработки методов их дифференцирования. Компания «ИМБИАН ЛАБ» разработала экспресс-тест на основе иммунохроматографии для одновременного раздельного выявления нуклеокапсидного N-антигена SARS-CoV-2 — штаммов B.1.1.7 (альфа), B.1.351 (бета), B.1.1.28, или P.1 (гамма), B.1.617.2 (дельта) и B.1.1.529 (омикрон) — а также гриппа А (H1N1)/A(H3N2) и гриппа В (линии Ямагата /Виктория) в мазках из носоглотки. Тест подходит для применения в качестве метода прикроватной диагностики, результаты можно получить через 7 минут.

О терапии гриппа и ОРВИ рассказал директор НИИ гриппа им. А.А. Смородинцева, Дмитрий Лиознов. Он отметил, что на начальных этапах инфекционного заболевания тяжесть протекания обусловлена в первую очередь возбудителем и его активностью, а затем на первый план выходят вторичные эффекты, включая воспалительные процессы.

Дмитрий Анатольевич перечислил «три столпа» терапии инфекционных заболеваний: симптоматическое лечение, патогенетическая терапия и этиотропная терапия. Последняя играет основную роль в обеспечении успешности лечения, особенно на первых этапах болезни, до развития осложнений. В качестве примера осложнений докладчик упомянул цитокиновый шторм — универсальную реакцию «гипервоспаления», которая проявляется при тяжелом течении крайне широкого спектра заболеваний, включая грипп, COVID-19, SARS и MERS.

Важно не только присутствие вируса, но и его количество: выраженность симптомов сильно зависит от титра вируса гриппа и РСВ. С другой стороны, показана эффективность противовирусных препаратов для снижения вирусной нагрузки, в том числе неспецифичных «офф-лейбл» препаратов, таких как рибавирин при терапии РСВ. Докладчик отметил, что данные о связи между вирусной нагрузкой и тяжестью ОРВИ довольно противоречивы, что может быть связано с отсутствием стандартизированных методов оценки вирусной нагрузки и техническими трудностями подобных исследований.

Затем Дмитрий Лиознов кратко описал группы риска по развитию осложнений при ОРВИ. Это, например, пациенты младшей и старшей возрастных групп, люди с хроническими патологиями, ожирением, нарушением иммунитета и беременные. Докладчик подчеркнул, что грипп может протекать в тяжелой или осложненной форме даже в отсутствии факторов риска.

Противовирусные препараты делятся на селективные и неселективные к гриппу. К селективным относятся агенты прямого действия — ингибиторы нейраминидазы (осельтамивир, занамивир), ингибиторы эндонуклеазы (балаксавир). Ингибиторы М2 каналов (например, амантадин), ранее широко применявшиеся, в настоящее время не показывают эффективности in vitro и постепенно уходят с рынка.

Неселективные препараты, эффективные против различных вирусов, делятся на препараты прямого и непрямого действия. К первой группе относятся ингибиторы фузии (умифеновир, энисамия йодид), репликации (риамиловир) и эндонуклеазы (фавипиравир). Препараты непрямого действия представлены интерферонами и другими иммуномодулирующими препаратами. По эффективности последних пока что нет однозначных данных.

Докладчик рассказал о документах, направляющих принятие решений по терапии пациентов с ОРВИ. Это временные рекомендации по COVID-19, клинические рекомендации по ОРВИ у взрослых и детей, а также клинические рекомендации по гриппу у взрослых, утверждение которых ожидается в ближайшее время. Разделы документов, касающиеся лечения, докладчик разобрал более подробно. Особое внимание он обратил на то, что сроки начала лечения не зависят от отсутствия или задержки результата диагностического тестирования на грипп. При выборе тактики лечения учитывается характер протекания заболевания и факторы риска.

Препараты адамантадинового ряда (амантадин, римантадин) не рекомендуются, так как большинство штаммов к ним устойчивы. Предпочтение отдается ингибиторам нейраминидазы — осельтамивиру и занамивиру. Однако их не следует назначать пациентам вне группы риска, у которых не наблюдается осложнений, чтобы снизить риск развития устойчивости у вируса. Докладчик также привел список остальных препаратов, включенных в клинические рекомендации.

Затем Дмитрий Анатольевич перечислил критерии назначения противовирусной терапии: пациентам с тяжелым протеканием гриппа, госпитализированным, людям, входящим в группы риска, а также детям, пожилым и беременным противовирусные препараты назначаются при подозрении на инфекцию в обязательном порядке. Возможно назначение противовирусной терапии амбулаторным больным, болеющим не дольше двух дней, пациентам, контактным с людьми из групп риска, а также медработникам, ухаживающим за последними.

В конце своего доклада Лиознов отметил важность разработки препаратов, действующих на широкий спектр респираторных вирусов, и подчеркнул, что ответственность за уместность клинических рекомендаций в каждом конкретном случае лежит на лечащем враче.

Главный внештатный специалист по инфекционным болезням у детей комитета по здравоохранению Правительства Санкт Петербурга, завотделением Детской городской клинической больницы им. Н.Ф. Филатова Елена Дондурей рассказала об опыте лечения ОРВИ у детей в 2022 году. Елена Александровна отметила, что частота заболеваемости респираторными инфекциями у детей различается каждый месяц. Так, за последний эпидсезон в разное время наблюдались подъемы заболеваемости SARS-CoV-2, риновирусом, РСВ и гриппом.

По словам докладчицы, распределение госпитализированных детей по возрастам в настоящее время возвращается к привычным значениям. Наибольшую долю (44%) составили дети в возрасте 0–2 лет; 26% — 3–6 лет; 20% — 7–13 лет; 10% 14–17 лет. При этом во время пандемии коронавируса наибольшая частота заболеваемости наблюдалась у школьников. Такая динамика говорит о том, что коронавирусная инфекция встраивается в привычную систему сезонных болезней.

В настоящее время медицинские учреждения сталкиваются преимущественно с гриппоподобными заболеваниями (ГПЗ) — острыми респираторными заболеваниями продолжительностью не более 7 дней, сопровождаемые кашлем, температурой 38°C и более. По типу ГПЗ могут протекать инфекции широким спектром вирусов, что затрудняет диагностику без лабораторных исследований. Тем не менее сотрудники Филатовской больницы выделили ряд критериев, позволяющих проводить клиническую диагностику гриппа. В их число вошли, среди прочего, гипертермия, бронхит без бронхообструктивного симптома и отсутствие вакцинации от гриппа в текущем сезоне.

Далее Елена Александровна перешла к терапии ОРВИ у детей и подчеркнула необходимость персонализированного лечения: «Когда мы назначаем тот или иной препарат, мы должны ответить на вопрос — зачем мы его назначаем? Не должно быть бездумного назначения всего спектра препаратов, которые мы помним».

Докладчица рассказала о так называемой рациональной терапии, включающей питьевой и диетический режим, этиотропную терапию и симптоматическое лечение. Объем терапии должен быть пропорционален тяжести заболевания: «Очень странно видеть ребенка с легкой формой инфекции, который горстями пьет разные препараты». В большинстве случаев лечение ОРВИ может проводиться в амбулаторном порядке с соблюдением домашнего режима. Елена Александровна рассказала о потребности в жидкости в зависимости от возраста ребенка и отметила, что чрезмерно обильное питье при ОРВИ не рекомендуется, потребление жидкости должно быть обусловлено потребностями организма. Повторный осмотр больных детей необходим при сохранении температуры более трех дней или при ухудшении состояния. При существенном осложнении протекания болезни нужна госпитализация. Важно проинформировать родителей о том, в каких ситуациях необходимо повторное обращение к врачу. Необходимо также аргументировать родителям назначения, особенно при лечении легких форм: «Наши родители почему-то считают, что если доктор ничего не назначил, то он просто ничего не знает».

В рамках клинических рекомендаций в качестве этиотропного лечения детям назначаются только ингибиторы нейраминидазы (осельтамивир, занамивир). Докладчица отметила недостатки этой группы препаратов: высокая специфичность, развитие резистентности, токсичность, возрастные ограничения. Среди препаратов широкого спектра клинические рекомендации упоминают интерфероны и умифеновир.

Елена Дондурей осветила также вопрос элиминационной терапии, в частности, потребность в очистке верхних дыхательных путей и аспирации (удалении) слизи, особенно у детей младшего возраста.

В качестве жаропонижающей терапии ВОЗ рекомендует парацетамол и ибупрофен, причем важно соблюдать разовые и суточные дозы препаратов. Не рекомендуется назначать детям ацетилсалициновую кислоту, нимесулид и метамизол натрия из-за риска развития побочных эффектов.

Сосудосуживающая терапия в клинических рекомендациях освещена недостаточно, поэтому Елена Александровна привела классификацию деконгестантов и рассказала о целях их назначения: субъективное облегчение состояния, нормализация сна и аппетита, предотвращение синуситов и отитов.

Клинические рекомендации не предусматривают назначение отхаркивающих препаратов при фарингите. При першении в горле назначают теплое питье, антисептические пластинки и леденцы. При навязчивом, сухом и непродуктивном кашле возможно применение препаратов, содержащих бутамират. Антигистаминную терапию, по словам Елены Александровны, стоит назначать по показаниям — при сильной отечности носа и аллергических симптомах. Не рекомендуется применение аскорбиновой кислоты.

Клинические рекомендации упоминают неэффективность паровых и аэрозольных ингаляций. Докладчица порекомендовала слушателям ознакомиться с учебным пособием по современной ингаляционной терапии А.В. Орлова и В.С. Матвеева, опубликованным в 2020 году.

Антибактериальная терапия не рекомендуется при лечении болезни, протекающей без осложнений, но может применяться при остром отите, пневмонии и прочих осложнениях и вторичных бактериальных инфекциях. Елена Александровна отметила, что осложнения при ОРВИ не всегда связаны с бактериальной инфекцией, они могут возникать вследствие действия вируса (поражение дыхательных путей, глаз, нервной системы и т.д.) или обострения хронических заболеваний.

В заключение докладчица рассказала о колебаниях в частоте бактериальной пневмонии в зависимости от времени года — летом частота подобных осложнений составляет до 10%, зимой до 30%. В 84% случаев возбудителем является пневмококк.

О вакцинах от гриппа и особенности вакцинации в ковидный период рассказал д.м.н., Михаил Костинов, зав. лабораторией вакцинопрофилактики и иммунотерапии аллергических заболеваний ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова. В мире циркулирует множество респираторных вирусов, в том числе тех, для которых не существует вакцин, отметил докладчик. Вакцины против гриппа доступны, тем не менее он все еще находится на четвертом месте по летальности

Центр по контролю и профилактике заболеваний США предупреждает о возможном тяжелом сезоне гриппа в 2022–2023 году. В частности, это связано со снижением популяционного иммунитета из-за отсутствия контакта с вирусом гриппа во время пандемии COVID-19, а также из-за снижения уровня вакцинации, поскольку внимание организаторов здравоохранения и общества было сосредоточено на SARS-CoV-2. При этом прогнозируется, что недоверие к вакцинам против COVID-19 может снизить приверженность вакцинации от гриппа.

Михаил Петрович рассказал о взаимосвязи между вакцинами от гриппа и COVID-19. Было показано, что усиление иммунитета после прививки от гриппа может повышать устойчивость к SARS-CoV-2 за счет неспецифического иммунного ответа. Вакцинация от гриппа не только снижает вероятность положительного теста на COVID-19 примерно на 23%, но и облегчает протекание заболевания (частота тяжелого течения меньше на 88%), снижает риск осложнений. Эти положительные эффекты особенно важны для медработников, взаимодействующих с больными COVID-19. Частота коинфекции гриппом и COVID-19 составляет всего около 9%. Но при этом летальность у пациентов с коинфекцией выше на 67%, чем при моноинфекции коронавирусом.

Вакцины против гриппа делятся на трехвалентные и четырехвалентные, в зависимости от количества подтипов и линий, на которые нацелена вакцина. Разница обычно заключается в том, включаются ли в вакцину антигены обеих линий гриппа B (B/Ямагата и B/Виктория) или только одной из них. Кроме того, вакцины могут содержать адъювант (азоксимера бромид). Детей прививают исключительно четырехвалентными вакцинами.

Принцип работы противогриппозных вакцин заключается в повышении экспрессии рецепторов врожденного иммунитета TLR8 и TLR9. Эти рецепторы распознают широкий спектр РНК-вирусов, в том числе COVID-19. Их высокая экспрессия позволяет нейтрализовать вирусные инфекции на ранних стадиях. Вакцины также повышают численность дендритных клеток, необходимых для эффективного иммунного ответа.

В ближайшие годы планируется полное замещение трехвалентных вакцин четырехвалентными. В настоящее время в России доступны четырехвалентные вакцины производства ФГУП СПбНИИВС ФМБА, компаний ФОРТ и «Петровакс». Костинов особо остановился на вакцине «ФЛЮ-М Тетра» (СПбНИИВС ФМБА), которая отличается высокой степенью очистки и низким содержанием аллергенов, таких как овальбумин.

Докладчик перечислил группы риска, которые должны быть вакцинированы в первую очередь: медработники и их семьи, дети, лица старше 65 лет, беременные и лица с хроническими заболеваниями. Рекомендуется проводить вакцинацию от гриппа не раньше 2-4 недель после болезни COVID-19 (по разным рекомендациям).

Руководитель управления молекулярной диагностики ООО «ИнтерЛабСервис» Максим Ионов представил доклад «Современный подход к автоматизации ПЦР диагностики ОРВИ». Максим Александрович отметил, что пандемия коронавируса выявила все преимущества молекулярных методов диагностики вирусных инфекций и способствовала их широкому распространению. Так, ЦНИИ эпидемиологии выпустил информационное письмо по молекулярной диагностике штаммов вируса гриппа. Алгоритм диагностики подразумевает выделение нуклеиновых кислот, проведение обратной транскрипции, определение группы, к которой принадлежит вирус (грипп A или B), и дальнейшую идентификацию конкретного штамма. Ионов привел список тест-систем и дополнительных реагентов, доступных в данный момент на российском рынке, включая транспортные среды, наборы «МАГНО-сорб», «РЕВЕРТА-L» и линейку наборов «АмплиСенс».

По словам докладчика, пациенты не представляют в полной мере трудоемкость ПЦР-тестирования: «Обычно мы видим то, что у нас забирают образец и потом выдают заключение… Что происходит с образцом внутри лаборатории, мы с вами очень часто не видим и даже не знаем». Многоступенчатость ПЦР-диагностики повышает риск ошибок. Автоматизация всех или некоторых этапов может решить проблемы воспроизводимости и стандартизации результатов, снизить вероятность контаминации и инфицирования сотрудников. Кроме того, автоматизация повышает пропускную способность лаборатории, что было особенно важно при беспрецедентном наплыве образцов во время пандемии.

Есть также сложности с прослеживаемостью информации об образцах и ведением баз данных. Докладчик определил прослеживаемость как пересечение физического потока (жизненного цикла образца в процессе анализа) и информационного потока (жизненного цикла информации об образце). Автоматизация информационного потока и его взаимодействия с физическим — одна из ключевых задач современной ПЦР-лаборатории.

Максим Александрович отметил, что в текущих условиях затруднительно обеспечение полностью закрытого цикла ПЦР-анализа в одном приборе. По этой причине ООО «ИЛС» предлагает программное обеспечение «FRT Manager» для управления real-time амплификаторами, анализа и интерпретации полученных данных и дальнейшей работы с информацией, включая печать бланков для пациентов и выгрузки информации в лабораторную систему, печать лабораторного журнала. «FRT Manager» позволяет осуществлять управление приборами через единый интерфейс даже в лабораториях, оснащенных амплификаторами разных фирм. Это снимает необходимость обучения персонала работе с несколькими системами и облегчает привлечение сотрудников из смежных лабораторий, которые привыкли к другим приборам.

Докладчик также обратил внимание, что далеко не все приборы оснащаются ПО, позволяющим напрямую интегрировать прибор в лабораторную систему и обеспечить передачу результатов в базы данных. В этих случаях «FRT Manager» выступает связующим звеном между прибором и лабораторной системой, позволяя к тому же проводить интерпретацию сырых данных, полученных от прибора в автоматическом режиме.

Затем Максим Александрович перешел к проблеме автоматизации всего рабочего цикла лаборатории, а не только амплификации. Для этих целей ООО «ИЛС» предлагает систему «КДЛ-МАКС», которая позволяет учитывать доступные в лаборатории методы экстракции, оборудование и наборы реагентов, информацию об образце. На основе этих данных система генерирует рабочие задания для персонала и оборудования. «КДЛ-МАКС» — персонализированное решение, которое можно адаптировать под нужды и возможности лаборатории. При этом «КДЛ-МАКС» интегрирует в себя функции «FRT Manager». Таким образом, обеспечивается централизованная организация и сопровождение всех этапов лабораторной работы независимо от того, проводятся они в ручном или автоматическом режиме. Максим Александрович привел пример использования «КДЛ-МАКС» на примере создания тандемов из систем Microlab STARlet и процессоров магнитных частиц.

Заключительный доклад вебинара — «Универсальное решение для микрочиповой диагностики COVID-19, гриппа A и гриппа B методом ОТ-ПЦР-РВ» — представил Роман Родин, специалист по продвижению и продажам ГК «Люмэкс» (презентация в pdf). Амплификатор «АриаДНА» производства «Люмэкс» использует технологию микрочипов. По сравнению с классическим пробирочным методом такая технология позволяет снизить объем образца с 25 до 1,2 мкл и сократить время проведения ОТ-ПЦР-РВ до 30–40 минут. При этом сохраняется высокая чувствительность анализа.

На поверхности чипа зафиксированы необходимые для ПЦР-анализа реагенты. Это позволяет исключить ошибки при изготовлении ПЦР-смеси, кроме того, значительно сокращаются трудозатраты на проведение анализа, снижаются требования к квалификации персонала.

ГК «Люмэкс» предлагает несколько вариантов комплектации чипов для одновременного выявления SARS-CoV-2 и вирусов гриппа A/B — на 30 и 48 ячеек. Так как на каждый образец отводятся две ячейки, чипы позволяют производить одновременный анализ 12 и 21 проб соответственно. Каждая ячейка содержит тест системы на ген М гриппа А, ген NEC гриппа B, ген N SARS-CoV-2 и ген HRP (эндогенный контроль). Чипы также содержат отрицательный контроль экстракции, отрицательный контрольный образец и положительный контрольный образец.

Небольшой размер прибора позволяет применять его мобильно в местах острой необходимости, подчеркнул докладчик. Герметизация проб на чипе минеральным маслом почти полностью исключает риск контаминации. Докладчик продемонстрировал интерфейс поставляемого с амплификатором ПО и описал протокол анализа с использованием чипов.

Роман Родин отметил, что Минздрав в настоящий момент рекомендует одновременное тестирование на SARS-CoV-2 и вирусы гриппа. Система «АриаДНА» предлагает удобное и быстрое решение этой задачи. Продолжается доработка системы для расширения спектра анализируемых возбудителей, в том числе для выявления бактериальных инфекций.

Источник